Quel est le type de milieu de culture cellulaire et comment s'y prendre ?
La culture de cellules animales consiste à prélever des tissus pertinents du corps de l'animal, à les disperser dans des cellules individuelles (à l'aide de trypsine ou de collagénase), puis à les placer dans un milieu de culture approprié pour permettre à ces cellules de se développer et de proliférer.
Quels sont les types de milieux de culture cellulaire ?
Selon l'historique de développement des milieux de culture cellulaire, les milieux de culture cellulaire peuvent être grossièrement divisés en plusieurs types, tels que la solution saline équilibrée, les milieux de culture cellulaire naturels, les milieux de culture cellulaire synthétiques, les milieux de culture cellulaire sans sérum et les milieux de culture cellulaire avec une quantité limitée composants chimiques.
1. Milieu de culture cellulaire DMEM
Le DMEM (milieu essentiel minimal modifié de Dulbecco) est obtenu par Dulbecco sur la base du milieu MEM. La quantité de chaque composant est doublée et divisée en deux types : faible en sucre (1000mg/L) et riche en sucre (4500mg/L). Les cellules se développent rapidement. Il est préférable d'utiliser un glucose élevé pour cultiver des cellules tumorales avec une faible adhérence et des clones, et il est souvent utilisé pour cultiver des cellules de myélome d'hybridome et des cellules transformées transfectées avec de l'ADN.
2. Milieu de culture de base neuronale
Il peut fournir des nutriments de base pour la croissance des neurones.
3. Milieu d'insecte Ipl-41
Le milieu d'insectes Ipl-41 est conçu pour l'expansion à grande échelle de la lignée cellulaire de Spodoptera frugiperda et est également couramment utilisé pour l'expression de protéines par le système d'expression de baculovirus (BEVS). Le milieu Ipl-41 est une amélioration de la formule IPL originale. Il a été développé par Weiss et al. Du laboratoire de pathologie des insectes du Département de l'agriculture des États-Unis. Il a été utilisé pour l'expansion à grande échelle des lignées cellulaires dérivées de Spodoptera meadowensis. Weiss a ajouté du sérum bovin fœtal et du milieu TPB au milieu de base, et a réalisé avec succès la culture continue à grande échelle de la lignée cellulaire ipl-21 AE (III).
Le milieu est principalement utilisé pour cultiver et maintenir des lignées cellulaires dérivées de lépidoptères et amplifier les virus de ces lignées cellulaires. Le milieu Ipl-41 a également été utilisé pour exprimer la protéine recombinante de baculovirus dans des cellules de Spodoptera sans sérum.
1.1 solution saline équilibrée (BSS)
Le BSS est principalement composé de sels inorganiques et de glucose. Sa fonction est de maintenir l'équilibre de la pression osmotique des cellules, de maintenir la stabilité du pH et de fournir une nutrition simple. Il est principalement utilisé pour rincer les cellules et préparer d'autres réactifs.
À l'heure actuelle, le sérum utilisé pour la culture cellulaire est principalement du sérum bovin, et certaines cellules spéciales sont également cultivées avec du sérum humain et du sérum de cheval. Le sérum bovin convient à la plupart des cellules de mammifères, mais il n'est pas exclu qu'il soit plus approprié d'utiliser d'autres sérums animaux lors de la culture de certaines cellules. Le sérum contient diverses protéines plasmatiques, polypeptides, graisses, glucides, facteurs de croissance, hormones, substances inorganiques, etc. ces substances atteignent l'équilibre physiologique en favorisant la croissance cellulaire ou en inhibant l'activité de croissance.
1.2 milieu de culture cellulaire synthétique
Le milieu de culture synthétique est une sorte de milieu de culture qui est synthétisé, conçu artificiellement et préparé avec des substances chimiques en fonction de la composition du milieu de culture naturel. Le premier milieu basique développé (MEM) est essentiellement un mélange isotonique tamponné au pH contenant du sel, des acides aminés, des vitamines et d'autres nutriments essentiels. Sur cette base, DMEM, IMDM, ham F12, prmi1640 et d'autres milieux de culture cellulaire synthétiques ont été continuellement développés.