Précautions pour la culture cellulaire
Précautions pour la culture cellulaire
(1) Lors de la culture d'une certaine cellule pour la première fois, vous devez d'abord rechercher le nom de la cellule pour comprendre les informations pertinentes, y compris le milieu de culture, le sérum, les additifs, le temps de digestion normal, le temps de passage, etc. en tant que cellules cultivées primaires), il est nécessaire de consulter la littérature pertinente pour obtenir des méthodes de culture plus précises.
(2) Lors de l'entrée dans la culture cellule à cellule, les étapes suivantes doivent être strictement suivies :
① Assurez-vous que toutes les solutions et tous les consommables pour le fonctionnement de la cellule ont été désinfectés et testés sans problème. N'utilisez pas de solutions et de consommables incertains. N'empruntez pas les solutions d'autres personnes, sauf dans des circonstances particulières.
② Assurez-vous que les poignets des vêtements sont enroulés ou que les poignets de la blouse blanche sont attachés.
③ Déterminez la quantité d'alcool dans la lampe à alcool et remplissez-la si nécessaire.
④ Assurez-vous que toutes les solutions et tous les consommables nécessaires sont à portée de main. Afin d'ouvrir le bouchon du flacon d'une seule main, tous les bouchons du flacon peuvent être desserrés avant l'expérience.
⑤ Essayez de ne pas verser la solution directement à moins que la bouche de la bouteille ne soit brûlée. Si le versement échoue et que la solution colle à l'embouchure de la bouteille, veuillez nettoyer soigneusement la périphérie de l'embouchure de la bouteille avec une serviette en papier vaporisée d'alcool à 75 % (ne pas toucher l'embouchure de la bouteille) et la brûler sur le flamme.
⑥ Si les consommables utilisés ne sont pas sûrs d'être propres pendant le fonctionnement, ils doivent être remplacés à temps.
⑦ Nettoyez à temps après l'expérience, gardez la zone de travail propre et bien rangée, et enfin nettoyez la table avec de l'alcool à 75 %.
(3) Prévention de la contamination cellulaire
① Les fournitures de laboratoire empêchent la pollution. Les réactifs, consommables et équipements utilisés pour la culture cellulaire doivent être soigneusement nettoyés et désinfectés, et la stérilisation des différentes solutions doit être prudente et ne peut être utilisée qu'après que le test de stérilité est négatif. La salle d'opération et le matériel stérile restant doivent être nettoyés, désinfectés et stérilisés régulièrement.
② Empêcher la pollution pendant le fonctionnement.
③ Les vêtements qui génèrent facilement de l'électricité statique ou qui absorbent la poussière doivent être remplacés par des blouses blanches avant d'entrer dans les cellules.
④ Avant le début de l'expérience, il est nécessaire de s'assurer qu'il n'y a pas de problème avec les gants. Tant que les gants sont en contact avec des objets extérieurs à l'enceinte de sécurité biologique, les gants doivent être désinfectés à temps.
⑤ Après être entré dans la salle de culture cellulaire, fermez la porte, asseyez-vous et marchez le moins possible pour éviter d'affecter le rideau d'air de l'enceinte de biosécurité. Essuyez les mains et les bouchons des bouteilles avec des boules de coton à 75 % d'alcool avant le travail. Vérifier rigoureusement le matériel, les solutions et les cellules utilisées au préalable. Ne pas apporter d'articles contaminés ou non stérilisés dans la salle stérile, encore moins les utiliser de manière désinvolte, afin d'éviter une pollution à grande échelle.
⑥ Le fonctionnement des cellules doit être léger. Le goulot de la bouteille doit être ouvert dans la zone stérile autour de la flamme, et le goulot de la bouteille doit être placé autour de la flamme pour une rotation et une combustion simples. Veillez à ne pas laisser la flamme brûler le goulot de la bouteille en plastique.
⑦ Pendant l'opération expérimentale, la cloison de l'enceinte de biosécurité doit être aussi basse que possible pour minimiser la conversation. En cas d'éternuement ou de toux, il ne doit pas faire face à la zone de travail pour éviter une pollution inutile.
⑧ Le bouchon de la bouteille doit être placé à l'envers loin de lui-même pour éviter que le bouchon de la bouteille ne soit pollué par une mauvaise utilisation.
⑨ Ne passez pas sur le récipient ouvert pour éviter la contamination cellulaire causée par des objets inconnus tombant sur les vêtements.
⑩ Pendant l'opération expérimentale, faites attention au remplacement opportun de la pipette Pasteur, de la tête de pipette et de la pipette, et n'effectuez pas un tuyau jusqu'au bout. En cas de contact avec des articles impurs ou indéterminés, ils doivent être directement jetés. Après l'expérience, il doit être nettoyé à temps pour garder le laboratoire propre et bien rangé. Enfin, le dessus de table doit être nettoyé avec de l'alcool à 75 %.
(4) Empêcher la contamination croisée des cellules
① Lors de la réalisation de diverses opérations de culture cellulaire, les instruments utilisés doivent être strictement distingués et il est préférable de les marquer pour identification. L'opération est effectuée en séquence et une seule cellule est traitée à la fois. Lorsque plusieurs cellules et plusieurs opérations sont effectuées ensemble, une confusion est susceptible de se produire.
② Pendant l'échange de liquide ou l'opération de passage, la tête de pipette et la pipette attachée aux cellules ne doivent pas toucher l'embouchure du flacon de réactif, afin d'éviter d'amener les cellules dans le milieu de culture et de polluer d'autres cellules.
③ Une fois que toutes les cellules sont achetées, introduites d'autres endroits ou établies par elles-mêmes, elles doivent être conservées et figées dans le temps. En cas de pollution, les cellules peuvent être réanimées et continuer à être cultivées.