La culture de cellules animales et son développement technologique dans la production de vaccins viraux
Le vaccin est un agent immunitaire automatique pour la prévention des maladies infectieuses, composé de micro-organismes pathogènes (tels que des bactéries, des virus, etc.) et de leurs métabolites par réduction artificielle de virus, inactivation ou génie génétique. Selon les différents types d'agents pathogènes infectieux qu'il prévient, il peut être grossièrement divisé en vaccins bactériens et vaccins viraux. De nombreux vaccins viraux utilisés dans la population doivent maintenant être préparés par le processus de culture, de purification, de concentration, d'inactivation ou de lyse du virus. Parce que les virosomes sont une sorte de micro-organismes parasites spécialisés dans les cellules hôtes, leur reproduction doit être effectuée dans leurs cellules hôtes spécifiques. Par conséquent,
1 procédé général de culture de cellules animales
La culture de cellules animales fait référence à la culture de populations de cellules animales vivantes in vitro. À l'heure actuelle, de nombreux domaines de la biotechnologie utiliseront cette technologie. Surtout dans le domaine de la médecine, la culture cellulaire a un rôle et une valeur particuliers. Par exemple, de nombreux vaccins ou médicaments génétiquement modifiés sont obtenus par culture cellulaire dans le processus de recherche et de production. Les instruments et équipements couramment utilisés pour la culture de cellules animales comprennent une salle aseptique, un établi ultra propre, un réfrigérateur à basse température, un pH-mètre, un stérilisateur à vapeur sous pression, un incubateur électrothermique à température constante, un appareil de culture, un incubateur à CO2, un bain-marie à température constante, un microscope inversé, une centrifugeuse , filtre stérile, dispositif de lavage, tableau de comptage de cellules et instrument électronique de technologie cellulaire, etc., L'équipement d'automatisation de la culture cellulaire cfam de Shenyang GREAT ELITES Intelligent Equipment Co., Ltd. peut réaliser la double culture des cellules, et la propreté peut atteindre la classe GMP un niveau de propreté. Il convient aux entreprises qui ont besoin d'un grand nombre de cellules cultivées. La culture cellulaire peut être divisée en culture cellulaire primaire et culture cellulaire en sous-culture.
1.1 culture cellulaire primaire
La culture cellulaire primaire est un processus dans lequel divers tissus du corps de l'animal sont extraits du corps, traités avec diverses enzymes (trypsine couramment utilisée), des agents chélateurs (EDTA couramment utilisé) ou des méthodes mécaniques, dispersés dans des cellules individuelles et cultivés dans un milieu approprié, afin que les cellules puissent survivre, croître et se reproduire.
Cependant, il existe également certains défauts dans la culture cellulaire primaire, tels que des facteurs exogènes potentiels, l'absence de vérification préalable de la normalisation et de grandes différences entre les lots en raison de l'influence de l'âge et de l'état de santé du donneur. Par conséquent, l'utilisation de cellules de passage stables pour cultiver ces virus au lieu de cellules primaires est devenue la future direction de développement.
1.2 sous-culture culture cellulaire
En sous-culture, lorsque la culture primaire est réussie, avec l'allongement du temps de culture et la division continue des cellules, une inhibition de contact se produit en raison du contact entre les cellules, et le taux de croissance ralentit voire s'arrête ; D'autre part, il sera également nocif pour la croissance ou l'empoisonnement en raison d'une accumulation insuffisante de nutriments et de métabolites. À ce moment, il est nécessaire de diviser la culture en petites parties et de les inoculer dans un autre récipient de culture (bouteille) pour la culture. Ce processus est appelé sous-culture ou re culture. Pour la culture monocouche, 80 % de cellules confluentes ou nouvellement confluentes constituent le stade de sous-culture idéal. La culture cellulaire en sous-culture dans la production de vaccins fait référence au processus de culture de lignées cellulaires stables, de prélèvement des lignées cellulaires cryoconservées destinées à la production et de leur culture après la réanimation cellulaire.