Quels sont les équipements couramment utilisés pour la culture cellulaire ?

Quels sont les équipements couramment utilisés pour la culture cellulaire ?

19-09-2022

1. Établi ultra propre




À l'heure actuelle, la grande majorité des laboratoires cellulaires utilisent des établis ultra propres pour obtenir un fonctionnement aseptique, avec un fonctionnement simple, une installation pratique, une faible occupation de l'espace et un bon effet de purification. Anhui Renhe Purification présente deux principaux types d'établis super propres - le type à flux latéral (type vertical) et le type à flux sortant (type à flux laminaire horizontal). Le principe de fonctionnement est généralement que l'air intérieur est initialement filtré par le filtre grossier, pressé dans la boîte de pression statique par le ventilateur centrifuge, puis finement filtré par le filtre à air à haute efficacité. Le flux d'air propre qui en résulte traverse la zone stérile à une certaine vitesse de vent sectionnelle uniforme, formant ainsi un environnement de travail sans poussière et stérile avec une grande propreté.




(1) Table de travail à flux latéral : le flux d'air après la purification de l'air s'écoule de gauche ou de droite vers le côté opposé à travers la table de travail, ou de haut en bas ou de bas en haut, formant une barrière de flux d'air pour maintenir la zone de travail stérile. La structure de la table de travail est fermée ;




(2) Table de travail de sortie : l'air purifié s'écoule vers l'opérateur, de sorte que le flux d'air étranger ne sera pas mélangé à l'opération. La structure de la table de travail est ouverte, mais le fonctionnement expérimental des substances nocives est défavorable à l'opérateur. La propreté de la table de travail ultra propre doit être régulièrement vérifiée par les services concernés. La propreté de la table de travail ultra propre qui répond aux exigences doit atteindre le grade 100 et la taille des particules doit être testée avec un compteur de particules de poussière ≤ 5 μ Le nombre de particules de poussière en m ne doit pas dépasser 3,5/L ; Le débit d'air doit être contrôlé entre 0,75 et 1,0 m3/s ; Le nombre moyen de colonies bactériennes est inférieur à 1, et le filtre doit être remplacé si nécessaire en fonction de la stérilité.




2. Microscope




Le microscope inversé est un équipement nécessaire pour le travail quotidien du laboratoire de culture cellulaire, qui est principalement utilisé pour comprendre quotidiennement la croissance cellulaire et observer s'il y a de la pollution. Si les fonds le permettent, il est recommandé d'utiliser un microscope à contraste de phase de haute qualité, un microscope anatomique, un microscope à fluorescence, un système d'enregistrement vidéo ou un appareil de prise de vue en accéléré équipé d'un système photographique pour prendre des photos et enregistrer la croissance cellulaire à tout moment.




3. Incubateur




Comme les cellules in vivo, les cellules cultivées in vitro doivent survivre à une température constante. Généralement, la température de croissance optimale est de 37 ℃ et la différence de température ne doit pas dépasser ± 0,5 ℃. Lorsque la température augmente de 2 ℃, elle devient défavorable à la survie des cellules et les cellules meurent bientôt lorsque la température dépasse 40 ℃. Par conséquent, l'incubateur thermostatique et l'incubateur à CO2 qui peuvent contrôler avec précision la température sont le meilleur choix.




(1) Incubateur à température constante : un incubateur à contrôle automatique de température étanche ou de type transistor doit être sélectionné, ce qui a une sensibilité élevée et un contrôle de température stable. L'incubateur thermostatique général est moins cher, mais son inconvénient est qu'il ne convient qu'à la culture fermée.




(2) Incubateur à CO2 : À l'heure actuelle, la plupart des salles de culture cellulaire ont été largement utilisées. L'avantage de l'incubateur à CO2 est qu'il peut fournir une certaine quantité de CO2 (la concentration courante est de 5%) nécessaire à la culture cellulaire, et il est facile de stabiliser le pH du milieu de culture, qui convient aux cultures ouvertes ou semi-ouvertes. Culture. Lors de l'utilisation du flacon de culture, afin de maintenir l'intérieur du flacon de culture ventilé avec le monde extérieur, le bouchon du flacon peut être légèrement desserré. Afin d'éviter la pollution cellulaire, lors de l'utilisation de cette méthode de culture, l'air dans la boîte de culture doit être maintenu propre et il doit être régulièrement désinfecté avec un rayonnement ultraviolet ou de l'alcool. Dans le même temps, le réservoir contenant de l'eau distillée stérile doit être placé dans la boîte de culture pour éviter l'évaporation de la solution de culture,




(3) Consommables de culture cellulaire : des boîtes de culture, des plaques ou des flacons peuvent être utilisés pour la culture de cellules.




4. Four (four de séchage)




Certains instruments et récipients utilisés pour la culture cellulaire doivent être séchés avant utilisation, et la verrerie doit être stérilisée à la chaleur sèche. Lors de la désinfection à la chaleur sèche, la température dans le four doit généralement atteindre plus de 160 ℃ et le four à air soufflé est généralement utilisé. Ses avantages sont une température uniforme et un bon effet, tandis que ses inconvénients sont un processus de chauffage lent. Lors du chauffage, il n'est pas permis de chauffer avant de souffler, mais le soufflage et le chauffage doivent commencer en même temps. Lorsque la température atteint 100 ℃, le soufflage doit être arrêté. Des précautions doivent être prises pour éviter de brûler le papier ou le coton qui enveloppe les ustensiles. Les débris brûlés peuvent affecter la croissance des cellules. Après la désinfection, la porte de la boîte ne peut pas être ouverte immédiatement pour éviter la casse de la verrerie due à un refroidissement soudain.




5. Dispositif de purification d'eau




La qualité de l'eau pour la culture cellulaire est élevée. L'eau pour la préparation de la culture cellulaire, le liquide lié à la culture cellulaire et l'eau pour le nettoyage des ustensiles de culture cellulaire doivent être rigoureusement purifiés au préalable. À l'heure actuelle, il existe une variété de méthodes de purification combinées pour rendre l'utilisation de dispositifs à eau pure capables de purifier l'eau ordinaire en eau pure et en eau ultra pure très flexible et pratique. Ils peuvent être fixés au mur, sur un bureau, équipés de réservoirs de stockage d'eau ou directement utilisés avec un pistolet de séparation de liquide. Ils peuvent également être configurés avec des fonctions de stérilisation en fonction des exigences de divers types d'eau expérimentale, éliminant efficacement les enzymes ADN, les enzymes ARN, la protéase, etc., ainsi que des dispositifs d'eau pure d'ultrafiltration capables d'éliminer efficacement les sources de chaleur et les endotoxines.




6. Réfrigérateur




L'équipement nécessaire du laboratoire de culture cellulaire doit être dédié et ne doit pas stocker de substances volatiles, inflammables et autres substances nocives pour les cellules, et doit être maintenu propre. Généralement, cela comprend les réfrigérateurs ordinaires, les réfrigérateurs à basse température et les réfrigérateurs à très basse température.




Réfrigérateur ordinaire: Il peut stocker du liquide de culture, une solution saline normale, un réactif liquide de Hanks et d'autres articles de culture, et peut stocker des échantillons de tissus pendant une courte période.




Réfrigérateur basse température -20 ℃ et réfrigérateur ultra basse température : utilisé pour stocker les préparations qui doivent être congelées pour maintenir l'activité biologique et doivent être conservées pendant une longue période, telles que les enzymes, le sérum, etc.




7. Cryostat cellulaire




Les conteneurs d'azote liquide couramment utilisés dans le réservoir peuvent être divisés en différents types et spécifications en fonction des besoins d'utilisation. Trois facteurs doivent être pris en compte lors de la sélection d'un conteneur d'azote liquide : la taille du volume, la facilité d'accès et d'utilisation et la volatilisation de l'azote liquide. La taille du conteneur d'azote liquide est généralement de 25 à 500 L, ce qui permet de stocker environ 250 à 15 000 cryotubes de 1 ml. La température la plus basse de l'azote liquide peut atteindre - 196 ℃, alors faites attention à éviter les engelures lors de l'utilisation. Étant donné que l'azote liquide est volatil, il est nécessaire d'observer la quantité d'azote liquide restant et de la compléter à temps pour éviter les dommages cellulaires ou la mort en raison d'un manque d'azote liquide. À l'heure actuelle, il existe de nombreux conteneurs intelligents de cryoconservation de cellules parmi lesquels choisir. Les conteneurs d'azote liquide équipés de contrôleurs électroniques peuvent réaliser une cryoconservation automatique; Le niveau d'azote liquide et la température de l'échantillon peuvent être surveillés pour s'assurer que la température de l'échantillon est toujours au point de température défini ; Le système d'alarme peut être configuré pour déclencher une alarme en cas de niveau d'azote liquide, de température, de batterie, de tension, d'alimentation et d'autres anomalies ; Dans le même temps, un système de dérivation des gaz chauds est prévu pour empêcher l'air chaud supérieur à - 130 ℃ de pénétrer dans le réservoir d'azote liquide, de manière à protéger plus efficacement l'échantillon et à empêcher la montée en température dans le récipient. De plus, le réservoir d'alimentation en azote liquide peut être sélectionné pour compléter l'azote liquide dans le réservoir de stockage via le tuyau de raccordement afin d'assurer la sécurité de l'échantillon. Le niveau d'azote liquide et la température de l'échantillon peuvent être surveillés pour s'assurer que la température de l'échantillon est toujours au point de température défini ; Le système d'alarme peut être configuré pour déclencher une alarme en cas de niveau d'azote liquide, de température, de batterie, de tension, d'alimentation et d'autres anomalies ; Dans le même temps, un système de dérivation des gaz chauds est prévu pour empêcher l'air chaud supérieur à - 130 ℃ de pénétrer dans le réservoir d'azote liquide, de manière à protéger plus efficacement l'échantillon et à empêcher la montée en température dans le récipient. De plus, le réservoir d'alimentation en azote liquide peut être sélectionné pour compléter l'azote liquide dans le réservoir de stockage via le tuyau de raccordement afin d'assurer la sécurité de l'échantillon. Le niveau d'azote liquide et la température de l'échantillon peuvent être surveillés pour s'assurer que la température de l'échantillon est toujours au point de température défini ; Le système d'alarme peut être configuré pour déclencher une alarme en cas de niveau d'azote liquide, de température, de batterie, de tension, d'alimentation et d'autres anomalies ; Dans le même temps, un système de dérivation des gaz chauds est prévu pour empêcher l'air chaud supérieur à - 130 ℃ de pénétrer dans le réservoir d'azote liquide, de manière à protéger plus efficacement l'échantillon et à empêcher la montée en température dans le récipient. De plus, le réservoir d'alimentation en azote liquide peut être sélectionné pour compléter l'azote liquide dans le réservoir de stockage via le tuyau de raccordement afin d'assurer la sécurité de l'échantillon. Le système d'alarme peut être configuré pour déclencher une alarme en cas de niveau d'azote liquide, de température, de batterie, de tension, d'alimentation et d'autres anomalies ; Dans le même temps, un système de dérivation des gaz chauds est prévu pour empêcher l'air chaud supérieur à - 130 ℃ de pénétrer dans le réservoir d'azote liquide, de manière à protéger plus efficacement l'échantillon et à empêcher la montée en température dans le récipient. De plus, le réservoir d'alimentation en azote liquide peut être sélectionné pour compléter l'azote liquide dans le réservoir de stockage via le tuyau de raccordement afin d'assurer la sécurité de l'échantillon. Le système d'alarme peut être configuré pour déclencher une alarme en cas de niveau d'azote liquide, de température, de batterie, de tension, d'alimentation et d'autres anomalies ; Dans le même temps, un système de dérivation des gaz chauds est prévu pour empêcher l'air chaud supérieur à - 130 ℃ de pénétrer dans le réservoir d'azote liquide, de manière à protéger plus efficacement l'échantillon et à empêcher la montée en température dans le récipient. De plus, le réservoir d'alimentation en azote liquide peut être sélectionné pour compléter l'azote liquide dans le réservoir de stockage via le tuyau de raccordement afin d'assurer la sécurité de l'échantillon.




8. Centrifugeuse




En culture cellulaire, la centrifugation est généralement utilisée pour préparer la suspension cellulaire, ajuster la densité cellulaire, laver et collecter les cellules. Une centrifugeuse de bureau à 4000 tr/min est généralement configurée ; Pour faire la sédimentation cellulaire, une force centrifuge de 80 à 100 G est nécessaire, car une force centrifuge excessive endommagera les cellules. Selon différentes exigences, il existe des centrifugeuses de grande capacité à température réglable, des centrifugeuses à grande vitesse, des centrifugeuses de congélation à basse température et d'autres centrifugeuses plus fonctionnelles.




9. Équilibre




La balance de précision et la balance analytique sont couramment utilisées. La précision de la balance analytique est généralement de 0,1 mg, 0,01 mg et 0,001 mg. Généralement, une balance appropriée est sélectionnée en fonction des exigences de volume d'échantillonnage et de précision : une balance avec une précision de 0,1 mg doit être sélectionnée lorsque le volume d'échantillonnage est supérieur à 100 mg ; La quantité d'échantillonnage est de 100 à 10 mg et une balance avec une précision de 0,01 mg est sélectionnée ; Une balance avec une précision de 0,001 mg doit être sélectionnée pour le volume d'échantillonnage de 10 mg. La balance doit être calibrée régulièrement. La balance avec fonction d'étalonnage automatique peut être sélectionnée pour un entretien facile. Lors de l'utilisation de la balance, faites attention à la propreté et évitez que la poudre et le liquide corrosifs n'entrent directement en contact avec la plate-forme de pesée.


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