Le milieu de culture est classé selon son utilisation

Le milieu de culture est classé selon son utilisation

13-09-2022

Selon différentes utilisations, le milieu de culture peut être divisé en milieu de culture de base, milieu de culture nutritif, milieu de culture d'enrichissement, milieu de culture sélectif, milieu de culture d'identification, milieu de culture anaérobie, etc.


1. Les milieux de base constituent la base nutritionnelle couramment nécessaire à la plupart des micro-organismes. Si un micro-organisme a des besoins particuliers, il peut ajouter certains ingrédients sur cette base, tels que l'eau peptonée, le milieu de culture en bouillon, la gélose nutritive, etc. Le milieu d'eau peptonée à 1 % est le milieu de base le plus simple. Ce milieu de base peut être utilisé pour la culture d'enrichissement bactérien général et le test de substrat indigo. Si des indicateurs et des sucres sont ajoutés, il sera préparé en milieu de fermentation de sucre pour le test de fermentation de sucre et deviendra un milieu d'identification ; Si la dose de chlorure de sodium est augmentée dans l'eau peptonée à 1% et que le pH est élevé à environ 8,6, elle deviendra de l'eau peptonée alcaline pour la culture d'enrichissement de Vibrio cholerae et deviendra un milieu d'enrichissement spécial.


2. Les milieux nutritifs ajoutent certains nutriments spéciaux, tels que le glucose, le sang, le sérum, l'extrait de levure, les facteurs de croissance, etc. au milieu de culture de base, afin que les bactéries ayant des besoins nutritionnels élevés puissent s'y développer. Streptococcus pneumoniae, etc. doit se développer dans un milieu contenant du sang ou du sérum ; Des œufs, des pommes de terre, de la glycérine, etc. doivent être ajoutés au milieu de culture de Mycobacterium tuberculosis. Le milieu nutritif le plus couramment utilisé est la gélose au sang.


3. Le milieu d'enrichissement est généralement un milieu liquide, qui est utilisé pour la culture d'enrichissement des bactéries. Il peut être utilisé largement ou spécialement. Le milieu d'enrichissement spécial contient souvent des nutriments spéciaux ou des facteurs de croissance nécessaires à la croissance des bactéries cibles.


4. Milieux sélectifs : le milieu sélectif contient des nutriments (bactéricides) et des agents bactériostatiques (sélecteurs). Une fois l'échantillon inoculé dans de tels milieux, les bactéries non cibles sont inhibées à des degrés divers en raison de l'inhibition sélective des agents bactériostatiques, ce qui est plus propice à la prolifération ou à la séparation des bactéries cibles. Le taux de détection positive des bactéries cibles peut être amélioré en utilisant le milieu sélectif pendant un certain temps puis en l'inoculant dans le milieu sélectif d'identification. Il existe de nombreux types d'agents bactériostatiques, tels que le vert malachite, le vert brillant, le sélénite de sodium, le désoxycholate de sodium, le sel biliaire, le sulfonate de tétrasulfure de sodium et divers antibiotiques. La quantité ajoutée d'agents bactériostatiques doit être appropriée et précise. Certains sont très toxiques et certains ne résistent pas à une forte fièvre. Une attention particulière doit être portée à la préparation.


5. Le milieu différentiel est un substrat de réaction et un indicateur ajouté au milieu de culture pour distinguer les caractéristiques de certains micro-organismes et les identifier. Il peut être divisé en support d'identification général et support d'identification sélectif. Le milieu qui sert uniquement à distinguer différentes espèces microbiennes est appelé milieu d'identification générale. Généralement, ce type de milieu n'ajoute pas d'agents bactériostatiques mais ne contient que des indicateurs, comme le milieu fer bisaccharidique de Kirschner, qui contient du glucose et du lactose. Le rouge de phénol est utilisé comme indicateur pour observer le changement de couleur du substrat de culture et de la surface inclinée pour déterminer la capacité de fermentation des bactéries au glucose et au lactose. Ajouter du citrate ferrique ammoniacal, Après culture, observer s'il y a un dépôt noir pour déterminer si les bactéries décomposent les acides aminés contenant du soufre dans la peptone pour produire du sulfure d'hydrogène ; Un autre exemple est la gélose éosine au bleu de méthylène, qui contient du lactose (substrat de réaction) et de l'éosine au bleu de méthylène (indicateur) pour identifier Escherichia coli, les bactéries pathogènes intestinales et d'autres bactéries diverses. Le milieu d'identification général est caractérisé par la présence d'indicateurs dans la formule et peut être utilisé pour distinguer différents types de micro-organismes. Certains milieux d'identification peuvent également être utilisés comme besoins spéciaux des bactéries pour isoler et cultiver certaines bactéries, telles que la gélose tryptone soja et la gélose au sang de couleur chocolat. qui contient du lactose (substrat de réaction) et de l'éosine bleu de méthylène (indicateur) pour identifier Escherichia coli, bactéries pathogènes intestinales et autres bactéries diverses. Le milieu d'identification général est caractérisé par la présence d'indicateurs dans la formule et peut être utilisé pour distinguer différents types de micro-organismes. Certains milieux d'identification peuvent également être utilisés comme besoins spéciaux des bactéries pour isoler et cultiver certaines bactéries, telles que la gélose tryptone soja et la gélose au sang de couleur chocolat. qui contient du lactose (substrat de réaction) et de l'éosine bleu de méthylène (indicateur) pour identifier Escherichia coli, bactéries pathogènes intestinales et autres bactéries diverses. Le milieu d'identification général est caractérisé par la présence d'indicateurs dans la formule et peut être utilisé pour distinguer différents types de micro-organismes. Certains milieux d'identification peuvent également être utilisés comme besoins spéciaux des bactéries pour isoler et cultiver certaines bactéries, telles que la gélose tryptone soja et la gélose au sang de couleur chocolat.


Certains inhibiteurs et indicateurs sont ajoutés au milieu de culture pour inhiber la croissance de certaines bactéries, favoriser la propagation des bactéries cibles et donner aux colonies bactériennes en croissance certaines caractéristiques pour faciliter l'identification et la sélection. Ce type de milieu de culture est appelé milieu d'identification sélective. Par exemple, SS Agar contient du lactose (substrat de réaction), du rouge neutre, du citrate ferrique d'ammonium (indicateur), du vert brillant et du sel biliaire (agent bactériostatique) dans la formule du milieu. Les agents bactériostatiques tels que le vert brillant et le sel biliaire peuvent inhiber la croissance des bactéries Gram-positives et de certains Escherichia coli, mais n'ont aucun effet sur Salmonella et Shigella. De plus, Escherichia coli peut fermenter le lactose pour produire de l'acide, rendant les colonies rouges. Salmonella et Shigella ne fermentent pas le lactose, et leurs colonies sont incolores. Si les bactéries produisent du sulfure d'hydrogène, il réagira avec le citrate d'ammonium ferrique pour former une précipitation de sulfure ferreux, et le centre de la colonie est noir ou brun. Afin d'atteindre l'objectif d'identification.


Ces dernières années, un milieu de développement de couleur spécial pour certaines bactéries a été développé au pays et à l'étranger en utilisant les enzymes spécifiques de certaines bactéries et en sélectionnant les substrats correspondants. Il a été utilisé pour l'isolement et l'identification de bactéries et a obtenu de bons résultats. Ce support de développement couleur est en fait également le support d'identification. Le principe de base est d'ajouter la combinaison de chromogène (ou fluorogène) et de substrat d'action bactérienne dans le milieu de culture, et lorsque les bactéries contiennent des enzymes correspondantes, la combinaison sera décomposée pour développer une couleur (ou afficher une fluorescence). Par exemple, le conjugué glycoside chromogène est décomposé sous l'action de la glycosidase pour séparer le glycoside du chromogène et afficher la couleur ; Les conjugués d'acides aminés fluorescents (pas de fluorescence) présentent une fluorescence en séparant les acides aminés des substances fluorescentes sous l'action de l'aminopeptidase. Les chromogènes courants pour le développement de la couleur sont : α- naphtol β- naphtol, o-nitrophénol, p-nitrophénol, p-nitroaniline, phénolphtaléine, 2-amino, 4-nitrobenzène, etc. ; Les fluorophores couramment utilisés comprennent la 4-méthylumbelliférone (également connue sous le nom de 7-hydroxy-4-méthylcoumarine) et ainsi de suite. À l'heure actuelle, le milieu de développement de couleur a été utilisé pour l'isolement, l'identification et la culture d'une variété de bactéries ou de champignons, tels que Salmonella, Escherichia coli, Listeria, Bifidobacterium, Lactobacillus, Candida albicans et d'autres milieux de développement de couleur. α- Naphtol β- Naphtol, o-nitrophénol, p-nitrophénol, p-nitroaniline, phénolphtaléine, 2-amino, 4-nitrobenzène, etc.; Les fluorophores couramment utilisés comprennent la 4-méthylumbelliférone (également connue sous le nom de 7-hydroxy-4-méthylcoumarine) et ainsi de suite. À l'heure actuelle, le milieu de développement de couleur a été utilisé pour l'isolement, l'identification et la culture d'une variété de bactéries ou de champignons, tels que Salmonella, Escherichia coli, Listeria, Bifidobacterium, Lactobacillus, Candida albicans et d'autres milieux de développement de couleur. α- Naphtol β- Naphtol, o-nitrophénol, p-nitrophénol, p-nitroaniline, phénolphtaléine, 2-amino, 4-nitrobenzène, etc.; Les fluorophores couramment utilisés comprennent la 4-méthylumbelliférone (également connue sous le nom de 7-hydroxy-4-méthylcoumarine) et ainsi de suite. À l'heure actuelle, le milieu de développement de couleur a été utilisé pour l'isolement, l'identification et la culture d'une variété de bactéries ou de champignons, tels que Salmonella, Escherichia coli, Listeria, Bifidobacterium, Lactobacillus, Candida albicans et d'autres milieux de développement de couleur.


Il existe également des milieux d'identification qui utilisent divers systèmes enzymatiques propres aux bactéries pour se décomposer et utilisent divers sucres, alcools, acides aminés ou autres substrats spécifiques pour produire des acides, des gaz, des alcalis ou d'autres substances visibles, afin d'identifier les bactéries, comme couramment milieux biochimiques utilisés.


Le milieu de culture utilisé pour le test des caractéristiques biochimiques des bactéries est caractérisé par l'ajout d'un substrat spécifique au milieu de culture basique sans sucre et l'ajout d'un indicateur. Une série de résultats de réactions biochimiques de bactéries dans un tel milieu de culture sont finalement affichés à travers l'indicateur. Ce type de milieu est un milieu d'identification de réaction biochimique. Selon le dosage, il peut être divisé en milieu biochimique majeur et milieu biochimique mineur. Il convient de noter que certains composants du milieu de test biochimique sont affectés par de nombreux facteurs, tels que la température et le pH élevés. lors de la préparation et de l'utilisation, il doit être strictement contrôlé en fonction de la situation réelle pour éviter que les composants efficaces ne soient endommagés, afin d'assurer son effet d'utilisation.


6. Le milieu anaérobie est un milieu pour l'isolement, la culture et l'identification des bactéries anaérobies, appelé milieu anaérobie. En raison du manque de diverses enzymes nécessaires au métabolisme aérobie, telles que le cytochrome et la cytochrome oxydase, la catalase et la peroxydase, et la superoxyde dismutase, les anaérobies sont incapables d'effectuer le métabolisme aérobie en raison de leurs propres défauts métaboliques, et l'énergie générée par la fermentation anaérobie est insuffisant. Par conséquent, les anaérobies ne peuvent pas se développer et survivre dans un environnement atmosphérique normal. Afin de permettre aux bactéries anaérobies de se développer normalement, il est nécessaire de préparer un milieu spécial avec des nutriments riches, un faible potentiel redox et des facteurs de croissance spéciaux.


Le milieu de culture anaérobie est généralement préparé à partir d'extraits de cœur, de cerveau ou d'autres organes, et il est souvent nécessaire d'ajouter du thioglycolate de sodium, de la cystéine, des résidus de viande, du fer réduit, du charbon actif et d'autres agents réducteurs ou matériaux désoxydants. Afin d'observer la teneur en oxygène du milieu de culture, de l'azurol ou du bleu de méthylène peuvent également être ajoutés au milieu de culture liquide comme indicateur redox. Le cœur, l'extrait de cerveau, la masse de foie et les résidus de viande contiennent des acides gras insaturés, qui peuvent absorber l'oxygène dans le milieu de culture. Le thioglycolate de sodium et la cystéine sont des agents réducteurs puissants, qui peuvent consommer l'oxygène dissous dans le milieu de culture. Le charbon actif sec et le coton absorbant peuvent également absorber l'oxygène dans le milieu de culture. Par conséquent, le but de l'ajout d'un agent réducteur et d'un matériau absorbant au milieu de culture est de créer un environnement anoxique du milieu de culture et de maintenir un faible potentiel redox. De plus, une couche de paraffine liquide peut être ajoutée à la surface du milieu de culture pour isoler le contact entre le milieu de culture et l'atmosphère.


7. Le liquide de culture cellulaire (LCL) fait référence au liquide utilisé pour cultiver, conserver et transporter des tissus, organes et cellules vivants in vitro à diverses fins. Il s'agit essentiellement d'un environnement nutritif simulant artificiellement la croissance in vivo, afin que les cellules puissent se développer et se reproduire dans cet environnement. Parce que le nombre de ses composants est clair et qu'il peut observer divers changements biologiques de l'objet étudié en régulant un certain composant, il est largement utilisé dans la recherche en biologie cellulaire. Les composants de la solution de culture cellulaire comprennent principalement de l'eau, des acides aminés, des vitamines, des glucides, des ions inorganiques, des facteurs de croissance, etc. Ces composants doivent être strictement sélectionnés et testés avant de pouvoir être utilisés. L'eau utilisée doit répondre aux exigences de l'eau d'essai de grade 2 (CB/T 6682-1992).


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