Introduction aux instruments et fonctions de culture cellulaire pour l'échange de technologies expérimentales cellulaires
La composition des alvéoles est généralement divisée en quatre zones : zone de préparation, zone de préparation, zone de stockage et zone stérile.
Les principales fonctions de la zone de préparation sont le nettoyage, la désinfection et la préparation ; La zone de préparation est principalement utilisée pour la préparation des milieux de culture et des réactifs ; La zone de stockage est utilisée pour la banque de cellules et le stockage des marchandises ; La zone stérile est l'endroit où le personnel du laboratoire change de vêtements, tamponne et cultive. Le processus de culture cellulaire peut être divisé en quatre parties selon leurs fonctions : culture cellulaire, stockage, préparation et stérilisation.
1、Instrument de culture cellulaire et introduction
[1. Établi super propre]
Le banc ultra propre à flux vertical est généralement utilisé pour la culture cellulaire. Sous pression positive, il n'y a pas de fuite de gaz. Seul l'objet d'exploitation est protégé, mais le personnel et l'environnement du laboratoire ne sont pas protégés.
L'irradiation ultraviolette réalise la fonction de stérilisation. Stérilisation ultraviolette (surface) + stérilisation à l'ozone (coin mort, déflecteur fermé). Chaque irradiation ultraviolette dure 20-30min, et l'air est soufflé pendant 10min avant utilisation (faites attention au changement d'air dans la salle de culture). La propreté atteint la classe 100.
Après 3000 heures, la puissance de la lampe ultraviolette sera réduite à 70% de l'original. Remplacez à temps le tissu filtrant grossier de la partie supérieure et retirez-le régulièrement pour le nettoyer.
[2. Cabinet de biosécurité]
Sous pression négative, le gaz ne fuit pas, ce qui non seulement protège l'échantillon, mais se concentre également sur la protection de l'opérateur et de l'environnement. Les cellules de sécurité secondaires transportent des virus (tels que hele / KB), des échantillons humains cliniques cultivés primaires (champignons), des expériences liées aux lentivirus.
[3. Cylindre de CO2]
Les bouteilles de CO2 sont principalement utilisées pour le stockage du gaz CO2. Dans le processus de culture cellulaire, la plupart des cellules doivent être réalisées à condition que la teneur en CO2 soit de 5 %. La bouteille de CO2 est principalement connectée à l'incubateur pour le maintien stable de la teneur en CO2.
[4. Microscope inversé]
Le microscope inversé est un équipement de routine nécessaire dans le travail quotidien du laboratoire de culture cellulaire. Il est principalement utilisé pour comprendre la croissance des cellules et observer la survenue d'une infection. Si les fonds le permettent, il est recommandé de choisir un microscope à contraste de phase, un microscope d'anatomie, un microscope à fluorescence, un système d'enregistrement vidéo ou un appareil de prise de vue en accéléré équipé d'un système de caméra, qui peut filmer et enregistrer la croissance cellulaire à tout moment. temps.
[5. Centrifugeuse de table]
La centrifugeuse est un instrument spécial qui utilise la force centrifuge pour séparer et précipiter le liquide mélangé (contenant des solides). Il est principalement utilisé pour préparer la suspension cellulaire, ajuster la densité cellulaire, laver et collecter les cellules. Le taux de centrifugation en culture cellulaire est généralement de 300xg (environ 1000rpm) pendant 5-10min. Une vitesse de rotation trop élevée entraînera la mort cellulaire. Selon les différents besoins, il existe des centrifugeuses plus fonctionnelles parmi lesquelles choisir, telles que des centrifugeuses de grande capacité à température réglable, des centrifugeuses à grande vitesse et des centrifugeuses de congélation à basse température.
[6. Incubateur à CO2]
Le CO2 est un produit métabolique des cellules, un composant essentiel de la croissance cellulaire, et également lié au maintien du pH du milieu de culture. En culture cellulaire, O2 et CO2 sont des conditions nécessaires à la croissance cellulaire. Les incubateurs à CO2 ont des types secs et humides, et les conditions de culture sont généralement fixées à 37 ℃ et 5% de CO2. L'eau dans le bac à eau de l'incubateur à CO2 est empêchée d'être contaminée par de l'eau stérile + un remplacement régulier de 2 semaines + un conservateur (0,02 % d'azide de sodium ou 2 % de sulfate de cuivre).
[sept. Plaque de comptage de cellules (dispositif)]
Le compteur de cellules est un instrument de comptage piloté par micro-ordinateur intégrant comptage, statistiques et affichage. Il est fiable et pratique à utiliser.
[8. Pipette]
La fonction principale de la pipette est d'aspirer et d'éliminer le liquide tel que le milieu de culture pendant la culture cellulaire. La plage de mesure principale utilisée en culture cellulaire est de 10ul / 100ul / 200ul / 1000ul.